一、“人基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA試劑盒”詳細參數(shù)

規(guī)格：96Ｔ

品牌：ＲＤ

保存條件：2-8℃低溫保存

保質(zhì)期：六個月

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【ELISA試劑盒】提供免費檢測服務(wù)：使用我公司試劑盒,只收取試劑盒的費用,其他輔助試劑全部免費。我們將根據(jù)實驗工作量和難易程度，雙方協(xié)定實驗周期，保質(zhì)保量完成委托實驗，并將實驗結(jié)果和材料用特快專遞免費寄送到您手中。

二、人基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA試劑盒實驗中zui可能出現(xiàn)問題       
一、所有孔未顯色？
分析原因：      
1、微孔加入抗體后，洗板不*，微孔中存在游離的抗體。          
2、用錯試劑。          
3、在操作中忘記加酶或抗體。     
 解決辦法：            
1、檢查洗板器械，比如洗板機管道是否堵塞、洗液是否用完。          
2、在加樣前，要看清瓶簽。          
3、嚴格按說明書操作步驟進行實驗，確保每步都到位。          
二、所有孔顯色偏低？
分析原因：    
1、微孔加入抗體后，洗板不*，微孔中存在游離的抗體。          
2、洗板不干凈。          
3、抗體污染了酶結(jié)合物等其它試劑。          
4、溫度沒達到要求。          
5、每孔加入的試劑量低于說明書要求量。      
解決辦法：     
1、手工加蒸餾水洗板時，要避免吸頭接觸微孔，常更換新的蒸餾水。    
2、洗板時要確保每孔都注滿蒸餾水（約400ul），且至少洗板五次。      
3、嚴格按說明書要求操作，每次取樣要更換吸頭。      
4、控制孵育溫度在25℃。       
5、加樣器吸頭安放牢固避免吸樣不足，加樣時務(wù)必將吸頭內(nèi)液體打盡。 

人基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA試劑盒Elisa實驗前的準備

1仔細閱讀說明書
2確定試劑盒在有效期內(nèi)
3按說明書確定所有試劑齊全(數(shù)量、體積)
4標本制備要規(guī)范，每份標本體積要按2-3個復(fù)孔以上的量制備(貯存)，盡量分裝做備份。短期內(nèi)無法實驗者，注意低溫保存
5準備好所有實驗額外所需物品，如試管、吸頭、移液器、離心機等
6根據(jù)檢測標本數(shù)量確定所需試劑的量
7按說明書將所用試劑平衡至室溫，配制所需試劑
DIY夾心法ELISA常見技術(shù)指南
8選擇抗體時選擇一個單抗和一個多抗進行配對；若選擇兩個單抗，必須識別不同表位的抗體；從同一家公司選擇抗體對。
9ELISA實驗中為了確定*信號和zui低背景應(yīng)將捕獲抗體(0.5-4μg/ml)和檢測抗體(0.25-2μg/ml)在預(yù)實驗中進行彼此相抗的滴定。同時，應(yīng)包括在適當范圍內(nèi)的標準品的系列稀釋。按試劑說明書常規(guī)提供的范圍進行操作。
10標準品的配制：對于每種細胞因子應(yīng)仔細閱讀說明書，注意每批的細節(jié)。在使用細胞因子前，瞬時離心試劑瓶，盡可能多地收回其中的細胞因子。根據(jù)每批說明書中的細節(jié)，將凍干的細胞因子復(fù)溶。
11一般待測抗原標準曲線的線性范圍的可通過將標準品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml。可利用標準的ELISA操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度。
12為了優(yōu)化靈敏度，建議過一夜孵育標準品和標本。
13若使用過氧化物酶作為顯色系統(tǒng)，應(yīng)嚴禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉，疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性。
14當測定混合液體中的抗原時，如血清，建議在標本稀釋液中加不相干的Ig.

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